大鼠脑膜细胞分离自脑膜组织;脑膜是颅骨与脑间的隔膜,一共有三层,由外向内为硬脑膜、蛛网膜和软脑膜。硬脑膜,是一厚而坚韧的双层膜,外层是颅骨内面的骨膜,仅疏松地附于颅盖,特别是在枕部与颞部附着更疏松,称为骨膜层。蛛网膜是一层半透明的膜,位于硬脑膜深部,其间有潜在性腔隙为硬脑膜下隙。软脑膜是紧贴于脑表面的一层透明薄膜,并伸入沟裂。在脑室壁的某些部位,软脑膜及其血管与室管膜上皮共同形成脉络组织。脉络组织中的血管反复分支成丛,突入脑室形成脉络丛。脑膜细胞围绕着大脑,参与中枢神经系统的正常发育,能稳定脑软膜表面的细胞外基质、组织放射状胶质细胞网络和小脑皮层分层结构。
产品属性
产品名称 大鼠脑膜成纤维细胞
组织来源 脑膜组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 大鼠脑膜成纤维细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 成纤维细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传3代左右;1-2代以内状态最佳
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠脑膜成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠脑膜成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠脑膜成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
解剖器械、培养皿、离心管、细胞筛
试剂:PBS、DMEM 完全培养基、0.25% 胰酶、双抗
二、取材与预处理
剪开大鼠颅骨,小心剥离大脑表面硬脑膜、软脑膜完整膜组织。
PBS 漂洗脑膜组织,去除粘连脑组织与血凝块,剪碎脑膜。
三、细胞分离与消化
胰酶 37℃消化 20min,吹打解离组织块。
培养基终止消化,滤网过滤杂质,离心收集细胞。
PBS 洗涤沉淀两次,去除消化液。
四、纯化与接种培养
完全培养基重悬接种培养瓶,差速贴壁纯化成纤维细胞。
48h 换液,去除未贴壁神经类杂细胞。
细胞铺满瓶底即可常规传代培养。
