大鼠脑静脉血管平滑肌细胞分离自脑静脉组织;与脑动脉相比,脑静脉管壁较薄。与身体其他部位的静脉不同,脑静脉管壁中没有静脉瓣,静脉血的回流依赖高位的势能。脑静脉血的回流路径可以归纳为:大部脑静脉血经脑深部静脉和脑血窦流入颈内静脉;小部脑静脉血经眼部翼状静脉丛,进入静脉导血管再到头皮,最后流入椎管中的椎旁静脉系统。脑静脉系统有大量交通枝静脉丛,即使两侧颈内静脉都被阻塞,大脑静脉血仍可经椎静脉和颈外静脉系统完成其回流。脑静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。
产品属性
产品名称 大鼠脑静脉血管平滑肌细胞
组织来源 脑静脉组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 大鼠脑静脉血管平滑肌细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 成纤维细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠脑静脉血管平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠脑静脉血管平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠脑静脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
显微剪镊、离心管、培养瓶、200 目滤网
试剂:无菌 PBS、高糖 DMEM+10% FBS、胶原酶消化液
二、取材与预处理
剥离脑静脉血管,刮除内膜内皮细胞,剪碎血管中膜组织。
预冷 PBS 漂洗组织碎块,清除残留血细胞。
三、细胞分离与消化
胶原酶 37℃摇床消化 35min,间断吹打打散组织。
血清终止消化,过滤后离心收集细胞沉淀,洗涤两次。
完全培养基重悬细胞。
四、纯化与接种培养
接种培养瓶静置贴壁培养,24h 换液去除死细胞。
细胞呈长梭形堆叠生长,每 2~3d 换液。
传代扩增培养,α-SMA 免疫染色鉴定。
