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大鼠脑静脉血管平滑肌细胞

大鼠脑静脉血管平滑肌细胞

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产品概述 product description

大鼠脑静脉血管平滑肌细胞分离自脑静脉组织;与脑动脉相比,脑静脉管壁较薄。与身体其他部位的静脉不同,脑静脉管壁中没有静脉瓣,静脉血的回流依赖高位的势能。脑静脉血的回流路径可以归纳为:大部脑静脉血经脑深部静脉和脑血窦流入颈内静脉;小部脑静脉血经眼部翼状静脉丛,进入静脉导血管再到头皮,最后流入椎管中的椎旁静脉系统。脑静脉系统有大量交通枝静脉丛,即使两侧颈内静脉都被阻塞,大脑静脉血仍可经椎静脉和颈外静脉系统完成其回流。脑静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。

产品属性

产品名称 大鼠脑静脉血管平滑肌细胞

组织来源 脑静脉组织

默认种属 SD大鼠,其他咨询

产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 大鼠脑静脉血管平滑肌细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)

换液频率: 2-3天换液一次

生长特性: 贴壁

细胞形态: 成纤维细胞样

传代比例: 1:2

传代特性: 可传5代左右;3代以内状态最佳

消化液: 0.25%胰蛋白酶

大鼠脑静脉血管平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

质量检测

实验室分离的大鼠脑静脉血管平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

方法简介

实验室分离的大鼠脑静脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。

操作步骤

一、实验前准备

显微剪镊、离心管、培养瓶、200 目滤网

试剂:无菌 PBS、高糖 DMEM+10% FBS、胶原酶消化液

二、取材与预处理

剥离脑静脉血管,刮除内膜内皮细胞,剪碎血管中膜组织。

预冷 PBS 漂洗组织碎块,清除残留血细胞。

三、细胞分离与消化

胶原酶 37℃摇床消化 35min,间断吹打打散组织。

血清终止消化,过滤后离心收集细胞沉淀,洗涤两次。

完全培养基重悬细胞。

四、纯化与接种培养

接种培养瓶静置贴壁培养,24h 换液去除死细胞。

细胞呈长梭形堆叠生长,每 2~3d 换液。

传代扩增培养,α-SMA 免疫染色鉴定。