大鼠脑静脉血管内皮细胞分离自脑静脉组织;与脑动脉相比,脑静脉管壁较薄。与身体其他部位的静脉不同,脑静脉管壁中没有静脉瓣,静脉血的回流依赖高位的势能。脑静脉血的回流路径可以归纳为:大部脑静脉血经脑深部静脉和脑血窦流入颈内静脉医|学教育网搜集整理;小部脑静脉血经眼部翼状静脉丛,进入静脉导血管再到头皮,最后流入椎管中的椎旁静脉系统。脑静脉系统有大量交通枝静脉丛,即使两侧颈内静脉都被阻塞,大脑静脉血仍可经椎静脉和颈外静脉系统完成其回流。脑静脉血管内皮细胞的主要功能是维持血管内外的动态平衡,合成和分泌细胞因子和介质参与免疫反应,维持凝血和纤溶的动态平衡。
产品属性
产品名称 大鼠脑静脉血管内皮细胞
组织来源 脑静脉组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)或明胶(0.1%)
培养基: 大鼠脑静脉血管内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 内皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传2-3代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠脑静脉血管内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠脑静脉血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠脑静脉血管内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
显微解剖套装、明胶包被培养器皿、细胞筛
试剂:预冷 PBS、内皮细胞完全培养基、Ⅰ 型胶原酶、终止血清
二、取材与预处理
分离大脑浅表静脉血管,冲洗管腔血液,去除血管外多余结缔组织。
无菌 PBS 冰浴清洗 3 遍,纵向剪开静脉血管。
三、细胞分离与消化
胶原酶浸泡消化血管内壁 18~25min,刮取内皮细胞。
培养基终止消化,筛网过滤大块组织,离心收集细胞。
PBS 重悬离心洗涤,去除红细胞污染。
四、纯化与接种培养
细胞悬液接种包被培养瓶,差速贴壁剔除平滑肌杂细胞。
隔天更换内皮培养基,观察典型内皮铺路石形态。
细胞汇合后分瓶传代培养。
