大鼠脑动脉血管平滑肌细胞分离自脑动脉组织;脑动脉有成对的颈内动脉和椎动脉互相衔接成动脉循环;静脉系多不与同名动脉拌行,所收集的静脉血先进入静脉窦再汇入颈内静脉;各级静脉都没有瓣膜。它包括脑的动脉系统和脑的静脉系统。脑动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。
产品属性
产品名称 大鼠脑动脉血管平滑肌细胞
组织来源 脑动脉组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 大鼠脑动脉血管平滑肌细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 成纤维细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠脑动脉血管平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠脑动脉血管平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠脑动脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
显微器械、无菌离心管、细胞筛、培养瓶
试剂:PBS、DMEM 完全培养基、0.1% 胶原酶、胰酶、双抗
二、取材与预处理
分离大鼠脑部动脉血管,剥离血管内膜内皮层,保留中膜平滑肌层组织。
PBS 漂洗组织血块,剪切成细小组织碎块。
三、细胞分离与消化
胶原酶 37℃消化 40min,充分解离平滑肌组织。
血清终止消化,过滤后离心收集细胞沉淀,PBS 洗涤两次。
吹打制备均匀单细胞悬液。
四、纯化与接种培养
接种至普通培养瓶,37℃培养,24h 后首次换液去除漂浮杂质。
细胞呈梭形束状生长即为平滑肌细胞,3 天换液一次。
细胞长满后常规胰酶消化传代,α-SMA 染色鉴定细胞类型。
