大鼠脑动脉血管内皮细胞分离自脑动脉组织;脑动脉有成对的颈内动脉和椎动脉互相衔接成动脉循环;静脉系多不与同名动脉拌行,所收集的静脉血先进入静脉窦再汇入颈内静脉;各级静脉都没有瓣膜,它包括脑的动脉系统和脑的静脉系统。脑动脉血管内皮细胞主要功能:①维持血管内外的动态平衡;②合成和分泌细胞因子和介质;③维持凝血和纤溶的动态平衡。
产品属性
产品名称 大鼠脑动脉血管内皮细胞
组织来源 脑动脉组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)或明胶(0.1%)
培养基: 大鼠脑动脉血管内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 内皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传2-3代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠脑动脉血管内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠脑动脉血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠脑动脉血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
显微解剖镊、直剪、培养皿、400 目滤网、明胶包被培养瓶
试剂:预冷 PBS、内皮细胞完全培养液、Ⅱ 型胶原酶、胎牛血清终止液
二、取材与预处理
取大鼠全脑,冰上剥离大脑基底动脉、大脑中动脉等脑动脉血管。
PBS 反复冲洗血管管腔内部,冲除管腔内残留血液,剔除血管外膜结缔组织。
三、细胞分离与消化
血管纵向剪开平铺,内皮面朝下浸泡于胶原酶溶液,37℃消化 20min。
轻柔刮取血管内壁内皮细胞,培养基中和消化,滤网过滤。
离心收集细胞,PBS 洗涤去除酶液与红细胞。
四、纯化与接种培养
细胞悬液接种明胶包被培养瓶,差速贴壁去除平滑肌杂细胞。
每 48h 更换内皮专用培养基,显微镜观察铺路石样细胞群落。
细胞密度达 85% 进行传代,CD31 标记鉴定内皮细胞纯度。
