大鼠脑成纤维细胞分离自大脑皮质组织；大脑分左右两个半球，大脑皮质（灰质）覆盖着每个大脑半球的大部分，它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面，即外侧面（约占整个皮质面积的1/3）、内侧面和底面（占2/3的面积）；半球表面有很多深浅不等的沟或裂，沟或裂之间的隆起叫回，它们大大增加了大脑的表面积；大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔，使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的脑成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30 min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6 h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
产品属性
产品名称 大鼠脑成纤维细胞
组织来源 大脑皮质组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 大鼠脑成纤维细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠脑成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠脑成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠脑成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
器械：解剖剪、弯镊、细胞筛、离心管、T25 培养瓶
试剂：预冷无菌 PBS、DMEM 高糖完全培养基（10% FBS + 双抗）、0.25% 胰蛋白酶
超净台提前紫外消毒 30min，器械高温灭菌。
二、取材与预处理
乳鼠脱颈处死，头部酒精消毒，剪开颅骨完整取出大脑脑组织。
预冷 PBS 漂洗脑组织，仔细剔除脑膜、血管血块，仅保留脑实质。
三、细胞分离与消化
脑组织充分剪碎至糊状，加入胰酶 37℃消化 25min，每隔 8min 吹打混匀。
加入完全培养基终止消化，200 目筛网过滤组织碎块。
滤液 1000rpm 离心 5min，PBS 洗涤细胞沉淀 2 次。
四、纯化与接种培养
完全培养基重悬细胞沉淀，直接接种培养瓶。
差速贴壁 30min，贴壁牢固的即为脑成纤维细胞，倒掉含神经细胞上清。
常规培养，2~3 天换液，细胞铺满瓶底即可常规传代扩增。
