大鼠毛囊细胞分离自皮肤毛囊组织;毛囊是与表皮上皮相连续、由表皮外胚层特化形成袋样上皮结构为主体,且由上皮和结缔组织(真皮间充质)共同构成的皮肤重要附属器。其基底是真皮凹进的真皮毛乳头,中心是一根毛发,立毛肌的一侧斜附在毛囊壁上,附着点的上方为皮脂腺通入毛囊的短颈,毛囊在皮肤表面的开口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下组织中,毛囊向下伸入真皮约有一厘米深度,它是由包绕毛发与表皮相连的上皮鞘,以及皮脂腺和立毛肌所组成的一个结构比较复杂的器官附件组织。毛囊实际上是由结缔组织和上皮两部分所组成,除了具有结缔组织和血管的真皮乳头(毛乳头)外,毛囊其余部分都是由表皮细胞分化而来。毛囊开口起始于皮肤表面,而每个毛囊又和一个或多个腺胞相连。每个腺胞解离成富含脂质的物质,却又通过一个共同和毛囊相通连的皮脂腺导管将分泌物运送到皮肤表面排出。
产品属性
产品名称 大鼠毛囊细胞
组织来源 胡须毛囊组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: 鼠尾胶原Ⅰ(2-5 μg/cm²)
培养基: 大鼠毛囊细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 梭形、多角形
传代比例: 1:2
传代特性: 可传1-2代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠毛囊细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠毛囊细胞经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠毛囊细胞采用中性蛋白酶-胶原酶联合消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
器械:精细显微镊、眼科剪、六孔板、无菌培养皿
试剂:预冷 PBS、毛囊专用无血清培养基、0.25% 胰酶、中性蛋白酶 DispaseⅡ
预处理:培养板用多聚赖氨酸包被备用
二、取材与预处理
大鼠背部剃毛,75% 酒精消毒皮肤,剪下背部皮肤组织。
PBS 漂洗皮肤,修剪多余皮下脂肪,皮肤表皮面朝上平铺,DispaseⅡ4℃过夜消化表皮真皮分离。
三、细胞分离与消化
分离真皮层,显微镊子逐个拔取完整毛囊毛球结构,收集毛囊置于 PBS 中。
毛囊组织剪碎,胰酶 37℃消化 15~20min,血清终止消化。
轻柔吹打制成单细胞悬液,1500rpm 离心 6min 收集细胞。
四、纯化与接种培养
弃上清,专用毛囊培养基重悬细胞,接种至包被六孔板。
24h 后首次换液去除未贴壁死细胞,每 3 天更换培养基。
细胞增殖汇合后低浓度胰酶轻柔传代,避免毛囊干细胞分化。
