大鼠颈动脉平滑肌细胞分离自颈动脉组织;颈动脉存在于脊椎动物颈部的动脉。有颈外动脉和颈内动脉。前者分布至头顶部和颜面部。后者进入颅内分布至脑和眼眶内。在发生时,鳃弓中不形成鳃的下颌弓,所以,从大动脉也不分入鳃动脉和出鳃动脉。从腹大动脉的前方发出颈外动脉,颈内动脉是通向第三鳃弓的血管延伸而形成的,但在某些鱼类、有尾两栖类和爬行类中,这一血管也将一些血液送至大动脉根。其它的高等脊椎动物的大动脉根,在第三、第四大动脉弓之间消失,所以,其第三大动脉弓形成纯粹的颈动脉。在相当于第三、第四大动脉弓之间的腹行大动脉的部分称为颈总动脉干(common co-rotid trunk);高等脊椎动物,是由颈总动脉干分为左、右颈总动脉,然后再各分支为颈外动脉和颈内动脉。颈动脉是将血液由心脏输送至头、面、颈部的大血管,是脑的主要供血血管之一,由内膜、平滑肌层及外膜层构成。与其相关常见疾病为颈动脉狭窄,颈动脉狭窄导致的缺血症状主要包括,头晕、记忆力、定向力减退、意识障碍、黑朦、偏侧面部和/或肢体麻木和/或无力、伸舌偏向、言语不利、不能听懂别人说的话等。研究颈动脉平滑肌细胞的体外培养,为研究治疗颈动脉狭窄提供一个细胞模型具有重要意义。
产品属性
产品名称 大鼠颈动脉血管平滑肌细胞
组织来源 颈动脉组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25 / 5×10^5Cells/Vial
培养基: 大鼠颈动脉血管平滑肌细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 成纤维细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传3代左右
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠颈动脉血管平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠颈动脉血管平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠颈动脉血管平滑肌细胞采用中性蛋白酶-胶原酶联合消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
显微解剖器械、培养皿、离心管;DMEM、胶原酶 Ⅱ、胰酶、PBS、FBS、抗生素。
超净工作台提前紫外灭菌。
二、取材与预处理
大鼠麻醉处死,颈部消毒,逐层分离颈部结缔组织,暴露颈总动脉。
小心剥离整条颈动脉,去除血管外膜脂肪与结缔组织,PBS 冲洗血管内残留血液。
纵向剪开血管,棉签轻擦内膜内皮细胞层,仅保留中膜平滑肌层。
三、细胞分离与消化
将血管中膜剪切成 1mm³ 组织碎块,加入 Ⅱ 型胶原酶 37℃消化 60min。
消化期间每 15min 吹打一次,直至组织基本解离。
完全培养基加入终止消化,吹打充分混匀。
四、纯化与接种培养
细胞悬液过滤后离心,PBS 洗涤沉淀两次。
培养基重悬细胞,接种培养瓶。
差速贴壁纯化,4h 换液去除杂细胞,后续常规传代扩增。
