大鼠精原干细胞分离自睾丸组织；睾丸是雄性生殖器官，也叫精巢，具体结构包括生精小管以及周围的结缔组织。生精小管也叫曲精小管、曲细精管，是睾丸上细长而弯曲的管道。精原干细胞是位于睾丸生精小管的生精上皮内的一群生精干细胞，是成体内的定向干细胞。精原干细胞的一些独特优势使其成为动物转基因的理想宿主细胞。精原干细胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多项生命活动的调节机制的深入研究，精子发生机理的进一步阐明以及精原干细胞转染，异体、异种移植技术的实际应用，都迫切需要找到一种可行的方法将其分离纯化，以期得到较高产量和纯度的有活力的精原细胞用于体外培养。在哺乳动睾丸内，精子发生时一个受高度调控和持续的过程，精原干细胞（SSCs）一方面进行自我更新维持干细胞数量，另一方面又不断执行分化成各级生精细胞直至最后生成精子。精原干细胞定居在曲精细管上皮的基膜处，是哺乳动物精子发生的最原始细胞，也是动物体内一起能将遗传信息传递的干细胞。精原干细胞体外培养体系的建立，在生物学、医学、畜牧业生产及制备转基因动物等领域具有广阔的应用前景。精原干细胞（SSCs）是生精上皮近基底膜的一群细胞，具有自我更新能力和多向分化潜能，是哺乳动物体内唯一能将遗传信息传递给下一代的成体干细胞。
产品属性
产品名称 大鼠精原干细胞
简称 SSCs
组织来源 睾丸组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5cells/T25
培养基： 大鼠精原干细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 梭形、圆形
传代比例： 1:2
传代特性： 可传1-2代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠精原干细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠精原干细胞经c-kit免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠精原干细胞采用先机械吹打、后胰蛋白酶消化，结合Percoll密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
解剖剪、镊子、不锈钢筛网（80 目 / 200 目）；DMEM 培养基、胶原酶 Ⅳ、胰酶、DNaseⅠ、PBS、双抗。
选用 7~10 日龄幼鼠，提前器械灭菌。
二、取材与预处理
处死大鼠，无菌摘取双侧睾丸，剔除睾丸外层白膜与附睾粘连组织。
预冷含双抗 PBS 漂洗睾丸组织 3 次，去除血液污染。
三、细胞分离与消化
剪开睾丸白膜，取出曲细精管组织团块，剪碎后加入 Ⅳ 型胶原酶 37℃消化 15min，打散间质组织。
离心弃上清，沉淀加入胰酶 + DNaseⅠ 混合消化液，37℃消化 12min，解离生精细胞团。
血清终止消化，反复吹打制备单细胞悬液。
四、纯化与接种培养
依次过 80 目、200 目筛，离心洗涤细胞 3 次。
采用差速贴壁法：先铺板 2h，贴壁细胞为支持细胞，吸取上清悬浮细胞即为富集精原干细胞。
干细胞专用培养基重悬接种，置于培养箱培养，定期换液。
