大鼠滑膜间充质干细胞分离自膝关节滑膜组织;滑膜组织是位于关节腔内面的内衬结构,各种关节内疾病均会累及滑膜。而滑膜细胞是维持关节正常功能的重要组织结构,同时在各种关节疾患中也是主要病变部位。骨关节炎(OA)以关节软骨退行性变为特征,其病理改变累及关节的各个组成部分,但绝不仅局限于软骨,还包括软骨下骨、滑膜、半月板和韧带。各组成部分的病理改变相互影响,相互作用,共同加速关节的退变。滑膜细胞是构成滑膜层的最大细胞群体,是维持关节正常功能的重要组织结构,它包埋在颗粒状无定性的基质中,基质内有分散的纤维分布。滑膜由A型(巨噬样滑膜细胞)、B型(成纤维样滑膜细胞)以及C型(树突细胞样滑膜细胞)细胞组成。滑膜细胞主要功能:①滑膜细胞产生润滑液成分,并且与关节腔的吸收和血液/润滑液交换有关;②滑膜细胞增生,表现为不依赖于支持物生长,并且分泌大量的效应分子来促进炎症和关节损坏;③是自身自分泌和旁分泌网络中效应因子的一部分。
产品属性
产品名称 大鼠滑膜间充质干细胞
组织来源 膝关节滑膜组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25 / 5×10^5Cells/Vial
培养基: 大鼠滑膜间充质干细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 成纤维细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠滑膜间充质干细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠滑膜间充质干细胞经CD90免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠滑膜间充质干细胞采用混合酶消化法结合有限稀释法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
常规解剖器械、无菌 PBS、0.25% 胰酶、基础 DMEM 完全培养基、细胞滤网灭菌备用。
超净台紫外消杀,实验耗材摆放就绪。
二、取材与预处理
打开大鼠四肢关节腔,刮取所有关节滑膜组织,PBS 冲洗 3 遍去除血污。
剔除多余结缔组织,剪切成细小组织碎块。
三、细胞分离与消化
胰酶 37℃消化 20~30min,轻柔吹打。
培养基终止消化,吹打混匀细胞悬液。
滤网过滤除去组织残渣。
四、纯化与接种培养
离心沉淀细胞,培养基重悬后接种培养瓶。
24h 换液去除漂浮杂质细胞。
常规隔天换液培养,所得为滑膜成纤维细胞 + 少量免疫类滑膜混合细胞,如需分群可后续分选纯化。
