大鼠滑膜成纤维细胞分离自膝关节滑膜组织；滑膜组织是位于关节腔内面的内衬结构，各种关节内疾病均会累及滑膜。而滑膜细胞是维持关节正常功能的重要组织结构，同时在各种关节疾患中也是主要病变部位。骨关节炎（OA）以关节软骨退行性变为特征，其病理改变累及关节的各个组成部分，但绝不仅局限于软骨，还包括软骨下骨、滑膜、半月板和韧带。各组成部分的病理改变相互影响，相互作用，共同加速关节的退变。滑膜细胞是构成滑膜层的最大细胞群体，是维持关节正常功能的重要组织结构，它包埋在颗粒状无定性的基质中，基质内有分散的纤维分布。滑膜由A型（巨噬样滑膜细胞）、B型（成纤维样滑膜细胞）以及C型（树突细胞样滑膜细胞）细胞组成。滑膜细胞主要功能：①滑膜细胞产生润滑液成分，并且与关节腔的吸收和血液/润滑液交换有关；②滑膜细胞增生，表现为不依赖于支持物生长，并且分泌大量的效应分子来促进炎症和关节损坏；③是自身自分泌和旁分泌网络中效应因子的一部分。
产品属性
产品名称 大鼠滑膜成纤维细胞
组织来源 膝关节滑膜组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 大鼠滑膜成纤维细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传3代左右
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠滑膜成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠滑膜成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠滑膜成纤维细胞采用混合酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
器械灭菌；间充质干细胞专用 DMEM-LG 培养基、0.1%Ⅰ 型胶原酶、PBS；100/200 目细胞筛。
离心管、培养瓶提前灭菌，全程低温取材减少细胞损伤。
二、取材与预处理
分离大鼠膝髋关节滑膜组织，PBS 反复清洗，去除血液、脂肪、筋膜。
无菌剪将滑膜剪为细小组织糜，尽量切碎增大消化接触面积。
三、细胞分离与消化
胶原酶 37℃水浴振荡消化 1h，期间多次吹打。
含血清培养基终止酶解，吹打制备悬液。
双层滤网逐级过滤，去除大块组织残渣。
四、纯化与接种培养
1000r/min 离心 5min，弃上清，干细胞完全培养基重悬。
接种培养瓶，37℃培养；48h 首次换液，弃悬浮细胞。
每 3~4d 换液，细胞达 80% 融合传代，利用干细胞贴壁慢、增殖稳定特性纯化，可后续流式鉴定。
