大鼠颌骨成纤维细胞分离自颌骨组织；颌骨，是指颌部的骨头，分为上颌骨和下颌骨。构成口腔上下部的骨头和肌肉组织，上部叫上颌，下部叫下颌。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30 min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6 h后细胞基本贴壁完全，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
产品属性
产品名称 大鼠颌骨成纤维细胞
组织来源 颌骨组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 大鼠颌骨成纤维细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠颌骨成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠颌骨成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠颌骨成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
解剖器械高压灭菌，超净台紫外消杀；提前分装预冷无菌 PBS、完全培养基、0.1%Ⅰ 型胶原酶消化液。
配制上皮专用培养基：DMEM/F12+15% FBS+1% 双抗 + 表皮生长因子 EGF；备好 100 目、200 目细胞筛。
培养瓶用多聚赖氨酸包被 30min，弃液晾干备用，提升上皮贴壁能力。
二、取材与预处理
大鼠处死后酒精消毒颈部区域，剪开颈前皮肤，暴露颌下腺腺体，小心分离腺体包膜与结缔组织，完整摘取双侧颌下腺。
预冷 PBS 漂洗腺体 3 次，剔除表面脂肪与筋膜，无菌条件下剪切成 0.5mm³ 细小组织碎块。
三、细胞分离与消化
组织碎块加入 Ⅰ 型胶原酶消化液，37℃摇床低速振荡消化 40min。
加入等量完全培养基终止消化，反复吹打制成单细胞悬液。
依次过 100 目、200 目滤网过滤，去除大块组织残渣。
四、纯化与接种培养
滤液 800r/min 离心 6min，弃上清，上皮完全培养基重悬沉淀。
接种至包被好的培养瓶，37℃培养箱培养；采用差速贴壁法：接种 2h 后换液，去除快速贴壁成纤维细胞。
每 2d 更换培养基，待上皮细胞成片生长后传代，获得纯化颌下腺上皮细胞。
