大鼠骨外膜细胞分离自骨外膜组织;骨外膜是指成骨细胞与破骨细胞紧贴骨密质外面包着的那层膜;在骨外膜和骨内膜中含有一种能够生成骨的细胞,称为成骨细胞,这种细胞具有使骨骼生长的功能。在骨外膜中还有另外一种专门破坏骨细胞的细胞,称为破骨细胞。这两种细胞作用相反又相互依据。成骨细胞像建筑工人,不停地生成新的骨组织,破骨细胞则像维修工人,不停地清除老化、死亡、破碎的骨结构,并且还负责拆除“违章建筑”,就是除去不需要的多余的骨组织,从而使骨的整体结构更符合生物力学的需要。正常情况下,两种细胞之间处于动态的平衡之中,完成骨的生长发育的新陈代谢。骨折之后,成骨细胞首先启动,从而促使新骨痂的生成,即骨折的愈合。但是,股痂只是恢复了骨的连续性,往往不符合生物力学的需要,改建塑形的过程则必须有破骨细胞的参与才能完成。
产品属性
产品名称 大鼠骨外膜细胞
组织来源 骨外膜组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 大鼠骨外膜细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 成纤维细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠骨外膜细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠骨外膜细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠骨外膜细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
1. 器械:精细眼科镊、显微剪、培养皿;试剂:0.1%Ⅰ 型胶原酶、DMEM 完全培养基、PBS
二、取材与预处理
1. 处死大鼠,剥离四肢长骨表面肌肉结缔组织,充分暴露骨外膜
2. 显微镊小心剥离长条骨外膜组织,PBS 漂洗去除血迹
三、细胞分离与消化
1. 骨外膜剪碎至 1mm³,加入 Ⅰ 型胶原酶 37℃水浴消化 90min
2. 间断吹打,培养基终止消化,过 70μm 滤网收集滤液
四、纯化与接种培养
1. 滤液离心洗涤 2 次,完全培养基重悬接种培养瓶
2. 差速贴壁去除杂细胞,3 天首次换液
3. 细胞汇合后胰酶传代纯化培养
