大鼠骨骼肌卫星细胞分离自大腿骨骼肌组织；骨骼肌又称横纹肌，肌肉中的一种，约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞，肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌，横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官，有丰富的血管、淋巴分布，在躯体神经支配下收缩或舒张，进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带（Ⅰ带）及暗带（A带）。明带染色较浅，而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间，有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段，叫做一个肌节。肌卫星细胞指骨骼肌中除骨骼肌纤维（肌细胞）外的一种扁平、有突起的细胞。着于肌纤维（肌细胞）表面；当肌纤维（肌细胞）受损后，肌卫星细胞可增殖分化，参与肌纤维（肌细胞）的修复，因此具有干细胞性质。
产品属性
产品名称 大鼠骨骼肌卫星细胞
组织来源 大腿骨骼肌组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25 / 5×10^5Cells/Vial
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）
培养基： 大鼠骨骼肌卫星细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传3-5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠骨骼肌卫星细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠骨骼肌卫星细胞经Desmin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠骨骼肌卫星细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合多次差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
1. 器械：眼科剪、眼科镊、手术直剪、弯镊、无菌培养皿、离心管、滤网（70μm）
2. 试剂：PBS 缓冲液、DMEM 完全培养基、0.25% 胰蛋白酶 - EDTA、Ⅰ 型胶原酶、双抗（青霉素 + 链霉素）
3. 耗材：细胞培养瓶、移液管、冻存管；动物：2~4 周龄 SD 大鼠
二、取材与预处理
1. 大鼠颈椎脱臼处死，75% 酒精全身浸泡消毒 5min，固定于无菌操作台板
2. 逐层剪开后肢皮肤，剥离双侧腓肠肌、比目鱼肌，剔除血管、脂肪、结缔组织
3. 无菌 PBS 反复漂洗肌肉组织 3 次，剪碎至 1mm³ 细小肉糜
三、细胞分离与消化
1. 组织碎块加入 Ⅰ 型胶原酶（2mg/mL），37℃水浴振荡消化 45min
2. 补加等量 0.25% 胰酶，继续 37℃消化 15min，期间每 5min 吹打一次
3. 加入含血清完全培养基终止消化，70μm 细胞筛过滤悬液，收集滤液
四、纯化与接种培养
1. 滤液 1200r/min 离心 5min，弃上清，PBS 重悬洗涤 2 次
2. 差速贴壁纯化：细胞悬液铺于培养瓶，37℃孵育 90min，吸出未贴壁上清（去除成纤维细胞）
3. 上清接种新培养瓶，加入骨骼肌卫星细胞专用完全培养基，37℃5% CO₂常规培养
