大鼠睾丸支持细胞分离自睾丸；睾丸支持细胞又称Sertoli细胞，在体内呈不规则的高锥体形，细胞基部附着在基膜上，顶部伸至曲精小管腔面。它是生精细胞的支架，为其提供必需的营养物质，能合成与分泌雄激素结合蛋白，为其提供高浓度的雄激素环境等，还具有构成血-睾屏障，形成睾丸内微环境，调节精子发生等功能。睾丸支持细胞是睾丸的主要组成细胞，能分泌多种生长因子和免疫抑制因子，不仅可为精子提供营养支持和免疫保护，也能对其他细胞，如胰岛和神经细胞提供营养支持，而且当其与胰岛或神经细胞共移植时，也能够为这些细胞提供免疫保护，提高植活率。因此，睾丸支持细胞在细胞移植中具有广泛的应用前景。制备高活率的Sertoli不仅对Sertoli的基础研究有重要价值，而且在精子发生等领域有重要意义。
产品属性
产品名称 大鼠睾丸支持细胞
组织来源 睾丸组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 大鼠睾丸支持细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传2-3代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠睾丸支持细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠睾丸支持细胞经Fas-L免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠睾丸支持细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
试剂 PBS、0.25% 胰酶、0.1%Ⅰ 型胶原酶、DMEM/F12+10% FBS+1% 双抗完全培养基、75% 酒精。
器械 显微镊、直剪、培养皿、80 目 + 200 目细胞筛、离心管。
15~25 日龄雄性大鼠，器械高压灭菌，操作台紫外消毒。
二、取材与预处理
处死大鼠，无菌摘取睾丸，PBS 清洗血迹，逐层剥离外层包膜与脂肪组织。
撕开睾丸白膜，将内部曲细精管全部挤出，PBS 反复漂洗 4 次，去除红细胞。
剪碎曲细精管组织成 1~2mm 细小碎块。
三、细胞分离与消化
组织碎块加入胶原酶，37℃水浴消化 20min，间断吹打至管状组织松散。
加入胰蛋白酶继续消化 10min，血清培养基终止消化。
悬液依次过 80 目、200 目筛网，截留曲细精管骨架，收集下方单细胞滤液。
四、纯化与接种培养
滤液 1200rpm 离心 5min，弃上清，培养基重悬洗涤沉淀 2 遍。
细胞悬液接种培养瓶，37℃培养箱差速贴壁 2h，弃上清去除间质细胞与生精细胞。
补加新鲜完全培养基继续培养，48h 首次换液；支持细胞呈多边形铺路石样生长，每 48h 换液，可传代 1~3 代。
