大鼠肺泡巨噬细胞分离自肺组织;肺是机体的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆盖于心之上。肺有分叶,左二右三,共五叶。肺经肺系(指气管、支气管等)与喉、鼻相连,故称喉为肺之门户,鼻为肺之外窍。肺泡由单层上皮细胞构成的半球状囊泡。肺中的支气管经多次反复分枝成无数细支气管,它们的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即为肺泡。巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞较易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。巨噬细胞(Macrophages)是一种位于组织内的白血球,源自单核细胞,而单核细胞又来源于骨髓中的前体细胞。巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞,在脊椎动物体内参与非特异性防卫(先天性免疫)和特异性防卫(细胞免疫)。它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫细胞,令其对病原体作出反应。肺泡巨噬细胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活跃,有重要防御功能。肺泡是重要的巨噬细胞储存器官,为结核病的研究提供了重要的材料。
产品属性
产品名称 大鼠肺泡巨噬细胞
简称 AM
组织来源 肺组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 大鼠肺泡巨噬细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 巨噬细胞样
传代比例: 不传代
传代特性: 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液: 利多卡因(12 mM)
大鼠肺泡巨噬细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠肺泡巨噬细胞经F4/80免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠肺泡巨噬细胞采用肺泡灌洗结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
套管针、注射器、无菌 PBS(含 EDTA + 双抗)、离心管、培养板。
麻醉处死大鼠,超净台消毒完毕。
二、取材与预处理
颈部切口暴露气管,气管插管固定套管针,结扎防止漏液。
胸腔放血处死大鼠,避免血液灌入肺泡污染。
三、细胞分离与消化
每次缓慢注入 5mL 预冷灌洗液,轻柔按压胸腔后回抽液体,重复灌洗 6~8 次。
合并所有灌洗液,即为肺泡巨噬细胞粗悬液,无需酶消化。
4℃静置短暂沉降大组织杂质。
四、纯化与接种培养
1200r/min 离心 8min,弃上清,PBS 洗涤沉淀 2 次。
RPMI1640 完全培养基重悬,接种细胞培养板。
37℃培养 2h,巨噬细胞可快速贴壁,弃上清洗掉未贴壁上皮杂细胞,后续培养使用。
