大鼠肺小动脉平滑肌细胞分离自肺小动脉组织;小动脉(smallartery),管径在0.3-1 mm之间,小动脉包括粗细不等的几级分支,也属肌性动脉。较大的小动脉,内膜有明显的内弹性膜,中膜有几层平滑肌,外膜厚度与中膜相近,一般没有外弹性膜。小动脉是决定周围循环阻力大小的主要因素,也是调节微循环灌注量的“总开关”。典型的小动脉,其管壁的厚度与管径相比约为1:2。中膜的肌层相对比其他动脉为厚,当平滑肌在神经支配下强力收缩时,其管腔可以完全闭塞,而使血液不能流入它所分布的毛细血管内,从而增加了周围血液循环的阻力。如果有许多小动脉同时收缩,可使血压显著上升。反之,当小动脉的平滑肌舒张时,则可使大量的血液流入毛细血管,外周阻力明显下降,血压降低。终末小动脉(terminal arteri-ole)的口径为20-30 μm;后小动脉(metar-teriole),又称毛细血管前小动脉(precapil-lary arteriole)的口径为12-15 μm。管壁内均有较稀疏的平滑肌,在毛细血管前小动脉分支的起始部分,管壁平滑肌成分增厚,叫做毛细血管前括约肌(precapillary sphinc-ter),其收缩或舒张,可调节真毛细血管的血流量,是调节微循环灌注量的“分开关”。
产品属性
产品名称 大鼠肺小动脉平滑肌细胞
组织来源 肺小动脉组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 大鼠肺小动脉平滑肌细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 成纤维细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传2-3代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠肺小动脉平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠肺小动脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠肺小动脉平滑肌细胞采用中性蛋白酶-胶原酶联合消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
超细显微剪镊、胶原酶混合液(胶原酶 Ⅰ+ 弹性蛋白酶)、无菌培养基、滤网、离心耗材。
二、取材与预处理
完整取出肺叶,在体视显微镜下精细分离细小肺动脉分支,剥离周边肺实质组织。
PBS 漂洗小动脉血管段,去除血迹。
三、细胞分离与消化
剪碎细小血管组织,混合酶 37℃恒温消化 40min,间断吹打。
胎牛血清终止消化,吹打制备细胞悬液。
200 目筛网过滤除去组织碎屑。
四、纯化与接种培养
离心收集细胞沉淀,培养基重悬接种。
差速贴壁去除成纤维细胞污染,前 48h 少量多次换液纯化。
细胞增殖呈束状生长后分瓶传代。
