大鼠肺大动脉内皮细胞分离自肺大动脉组织;肺大动脉亦称肺动脉干。在呼吸空气的脊椎动物中,把静脉血由心脏导向肺脏的动脉。肺大动脉起于右心室,在主动脉之前向左上后方斜行,在主动脉弓下方分为左、右肺动脉,经肺门入肺。肺动脉干位于心包内,为一粗短的动脉干。起自右心室,在升主动脉前方向左后上方斜行,至主动脉弓下方分为左、右肺动脉。左肺动脉较短,在左主支气管前方横行,分二支进入左肺上、下叶。右肺动脉较长而粗,经升主动脉和上腔静脉后方向右横行,至右肺门处分为三支进入右肺上、中、下叶。细胞呈单层多角形铺路石状分布;该细胞在维持血管内外的动态平衡、合成和分泌细胞因子和介质、维持凝血和纤溶的动态平衡中起重要作用。肺大动脉内皮细胞呈单层多角形铺路石状分布,该细胞在维持血管内外的动态平衡、合成和分泌细胞因子和介质、维持凝血和纤溶的动态平衡中起重要作用。
产品属性
产品名称 大鼠肺大动脉内皮细胞
组织来源 肺大动脉组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)或明胶(0.1%)
培养基: 大鼠肺大动脉内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 内皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传2-3代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠肺大动脉内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠肺大动脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠肺大动脉内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
器械:显微剪、显微镊、止血钳、离心管、培养皿、胶原酶 Ⅱ、培养瓶、手术丝线;全部无菌处理。
试剂:无菌含双抗 PBS、0.1% 胶原酶 Ⅱ、内皮细胞专用完全培养基、75% 酒精。
超净台紫外消杀,麻醉试剂配置完毕。
二、取材与预处理
麻醉处死大鼠,消毒开胸,游离肺动脉主干及大动脉段,小心剥离血管外侧脂肪与结缔组织,避免戳破血管壁。
PBS 冲洗血管外表面,结扎血管远端,从近端注入 PBS 冲净管腔内血液,全程冰上操作防止细胞失活。
三、细胞分离与消化
向血管管腔内灌满 0.1% 胶原酶 Ⅱ 消化液,两端结扎封闭,37℃水浴孵育 25~30min。
剪开血管一端,收集管内消化液,再用培养基反复冲洗血管内腔,合并所有冲洗液与消化液。
吹打混匀细胞悬液,过 200 目滤网去除组织碎屑。
四、纯化与接种培养
800r/min 离心 6min,弃上清,专用培养基重悬沉淀,离心洗涤 1 次。
细胞悬液接种至提前用明胶包被的培养瓶,置于培养箱孵育。
4~6h 首次换液去除平滑肌、成纤维细胞杂细胞;每 2d 换液,细胞铺满即可传代鉴定。
