大鼠肺大静脉内皮细胞分离自肺大静脉组织;肺大静脉在用肺呼吸的脊椎动物中,把动脉血由肺送回心脏的静脉,是唯一一个静脉里流动脉血的血管。左右1对,共4条,两条连接右肺,两条连接左肺。肺静脉异位引流是指肺静脉未能直接与左心房连接,而与右心房或体静脉系统连接的先天性心血管异位。肺静脉淤血性肺动脉高压,是由于肺静脉内血液淤滞而引起的肺动脉高压。正常情况下,肺循环具有血压低、阻力小和顺应性大的特点,肺动脉压力高低取决于单位时间内肺动脉血流量和肺血管的阻力,要维持肺循环的低压、低阻的状态,必须保证整个肺循环系统的畅通无阻,血液顺利地由肺动脉经毛细血管进入肺静脉,再入左心室,经过左心室收缩进入体循环,才能避免肺动脉内压力升高。细胞呈多边形鹅卵石状排列;该细胞在维持血管内外的动态平衡、合成和分泌细胞因子和介质、维持凝血和纤溶的动态平衡中起重要作用。
产品属性
产品名称 大鼠肺大静脉内皮细胞
组织来源 肺大静脉组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)或明胶(0.1%)
培养基: 大鼠肺大静脉内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 内皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传2-3代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠肺大静脉内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠肺大静脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠肺大静脉内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
显微镊剪、结扎线、离心管、明胶包被培养皿;胶原酶 Ⅱ、内皮完全培养基、无菌 PBS。
实验环境提前紫外灭菌,动物麻醉备用。
二、取材与预处理
暴露胸腔分离肺大静脉,剥离外周脂肪组织,结扎血管两端,PBS 冲净管腔淤血。
冰 PBS 浸泡血管,防止内皮细胞缺氧凋亡。
三、细胞分离与消化
静脉管腔灌注胶原酶 Ⅱ,两端封扎,37℃水浴消化 20~25min。
释放消化液,培养基反复灌洗血管内壁,收集全部液体。
滤网过滤除去组织残渣。
四、纯化与接种培养
低速离心收集细胞,培养基重悬洗涤一次。
接种于明胶预包被培养器皿,培养箱孵育。
6h 后换液去除悬浮杂细胞,隔天换液培养,免疫荧光鉴定 CD31 内皮标志物。
