大鼠大隐静脉平滑肌细胞分离自大隐静脉；大隐静脉起于足背静脉弓内侧端，经内踝前方，沿小腿内侧缘伴隐神经上行，经股骨内侧髁后方，进入大腿内侧部，与股内侧皮神经伴行，逐渐向前上，在耻骨结节外下方穿隐静脉裂孔，汇入股静脉，其汇入点称为隐股点。有5条属支：旋髂浅静脉、腹壁浅静脉、阴部外静脉、股内侧浅静脉和股外侧浅静脉，它们汇入大隐静脉的形式多样，相互间吻合丰富。大隐静脉曲张行高位结扎时，须分别结扎、切断各属支，以防复发。大隐静脉平滑肌细胞主要功能：①血管平滑肌细胞的生长潜力是原发血管病发的重要异常因素；②参与血管壁的炎症反应，并与血管疾病的进展和稳定有关。因此，研究大隐静脉平滑肌细胞的代谢和信号通路是研究大隐静脉扩张等疾病的良好实验材料。大隐静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。
产品属性
产品名称 大鼠大隐静脉平滑肌细胞
组织来源 大隐静脉组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 大鼠大隐静脉平滑肌细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠大隐静脉平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠大隐静脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠大隐静脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
1. 试剂：无菌 PBS、0.1%Ⅱ 型胶原酶、DMEM 高糖完全培养基（10% FBS + 双抗）。
2. 显微解剖器械、离心管、滤网灭菌；超净台、37℃水浴提前准备。
二、取材与预处理
1. 大鼠后肢解剖分离大隐静脉，肝素 PBS 冲净管腔血液，剪下血管。
2. 纵向剪开血管管壁，用棉签轻柔擦拭血管内膜，彻底去除内皮细胞。
3. 剥离血管外膜结缔组织，仅保留中膜平滑肌层，剪碎组织至 1mm³ 碎块。
三、细胞分离与消化
1. 组织碎块加入 Ⅱ 型胶原酶消化液，37℃摇床消化 70~90min，期间多次轻柔吹打。
2. 血清培养基终止酶解，1000rpm 离心 5min 弃上清。
3. PBS 洗涤细胞沉淀两次。
四、纯化与接种培养
1. 悬液过 200 目筛网，离心收集细胞，完全培养基重悬接种培养瓶。
2. 37℃培养箱静置培养，24h 换液去除漂浮碎片与杂细胞。
3. 每 2~3 天更换培养基，细胞铺满瓶底后胰酶消化传代，可采用酶消化法 / 组织贴块法两种方式扩增。
