大鼠大隐静脉内皮细胞分离自大隐静脉；大隐静脉起于足背静脉弓内侧端，经内踝前方，沿小腿内侧缘伴隐神经上行，经股骨内侧髁后方，进入大腿内侧部，与股内侧皮神经伴行，逐渐向前上，在耻骨结节外下方穿隐静脉裂孔，汇入股静脉，其汇入点称为隐股点。有5条属支：旋髂浅静脉、腹壁浅静脉、阴部外静脉、股内侧浅静脉和股外侧浅静脉，它们汇入大隐静脉的形式多样，相互间吻合丰富。大隐静脉曲张行高位结扎时，须分别结扎、切断各属支，以防复发。大隐静脉内皮细胞对维持大隐静脉动态平衡起着重要作用。它们合成、分泌凝血和纤溶系统的激活因子和抑制因子、影响血小板粘附和聚集的调节因子；大隐静脉内皮细胞还释放控制细胞增殖和调节血管壁紧张度的分子。
产品属性
产品名称 大鼠大隐静脉内皮细胞
组织来源 大隐静脉组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件： PLL（0.1 mg/mL）或明胶（0.1%）
培养基： 大鼠大隐静脉内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 内皮细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传2-3代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠大隐静脉内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠大隐静脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠大隐静脉内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
1. 试剂：无菌肝素化 PBS、0.1%Ⅰ 型胶原酶、内皮细胞专用培养基、0.1% 明胶包被液。
2. 培养皿 / 培养瓶明胶包被过夜，次日 PBS 冲洗备用；解剖显微剪、镊子灭菌。
3. 水浴锅 37℃预热，超净台紫外灭菌。
二、取材与预处理
1. 大鼠麻醉固定，后肢腹股沟处剪开皮肤，分离并游离双侧大隐静脉，结扎两端血管。
2. 肝素 PBS 从血管一端缓慢灌注，冲净管腔内血液，剪下完整静脉血管段，置于冰 PBS 中。
3. 去除血管外侧脂肪与结缔组织，尽量保持血管管壁完整。
三、细胞分离与消化
1. 血管一端注入胶原酶消化液，夹闭两端，37℃水浴孵育 25~30min。
2. 剪开血管一端，吹打管腔内壁，洗脱内皮细胞，收集消化混合液。
3. 加入等量完全培养基终止消化，1000r/min 离心 6min。
四、纯化与接种培养
1. 弃上清，培养基重悬细胞沉淀，过 200 目筛除去组织碎屑。
2. 接种至明胶包被培养瓶，37℃培养，6h 后首次换液。
3. 利用差速贴壁纯化，去除平滑肌杂细胞，隔天换液，细胞融合后传代。
