大鼠肠平滑肌细胞分离自全肠组织；不区分大肠、小肠等；小肠位于腹中，上端接幽门与胃相通，下端通过阑门与大肠相连，是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内，上连胃幽门，下接盲肠，分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的，因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后，基本上完成了消化过程，同时营养物质被小肠粘膜吸收了。小肠管壁由粘膜、粘膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞，粘膜有许多绒毛，绒毛根部的上皮下陷至固有层，形成管状的肠腺，其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切；构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似，接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似，绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短，不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能，其中以吸收和分泌功能为主。平滑肌细胞的收缩是负责肠蠕动的动力，促使食物向下运动。小肠平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。小肠平滑肌肉瘤是起源于小肠壁肌层、黏膜下肌层和肠壁血管平滑肌的恶性肿瘤，是小肠结缔组织恶性肿瘤中最常见的一种。因此，体外小肠平滑肌细胞的培养对研究小肠平滑肌肉瘤提供了基础和前提。此外，体外培养细胞，由于影响因素较为单一，是研究细胞功能以及相应的细胞信号转导机制的基础。
产品属性
产品名称 大鼠肠平滑肌细胞
组织来源 全肠组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25 / 5×10^5Cells/Vial
培养基： 大鼠肠平滑肌细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 成纤维细胞样
传代比例： 1:2
传代特性： 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠肠平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠肠平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠肠平滑肌细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
1. 试剂配制：无菌 PBS（含双抗 100U/mL 青霉素 + 100μg/mL 链霉素）、0.1%Ⅱ 型胶原酶消化液、完全培养基（DMEM/F12+10% 胎牛血清 + 双抗）、75% 医用酒精。
2. 器械灭菌：解剖剪、直弯镊子、眼科剪、培养皿、离心管、滤网（200 目），高温高压灭菌烘干备用。
3. 动物与环境：SD 大鼠（150~200g），超净台紫外消毒 30min，水浴锅预热 37℃。
二、取材与预处理
1. 大鼠腹腔注射 10% 水合氯醛麻醉，75% 酒精全身浸泡消毒腹部皮肤，仰卧固定于解剖板。
2. 沿腹中线剪开腹壁，取出空肠、回肠段，剔除肠系膜、脂肪组织，放入预冷无菌 PBS 中反复漂洗 5 次，冲净肠内容物与血污。
3. 纵向剪开肠管，PBS 刮除肠黏膜层上皮组织，仅保留肠壁肌层组织，剪成 1mm³ 细小组织碎块。
三、细胞分离与消化
1. 组织碎块移入离心管，加入 0.1%Ⅱ 型胶原酶消化液，37℃水浴振荡消化 60~90min，每 15min 轻柔吹打一次。
2. 消化至组织絮状松散，加入等量完全培养基终止酶解，1000r/min 离心 5min 弃上清。
3. 沉淀用 PBS 重悬洗涤 2 次，去除残留消化酶。
四、纯化与接种培养
1. 细胞悬液过 200 目细胞筛去除未消化组织团块，滤液再次离心收集细胞沉淀。
2. 用完全培养基重悬细胞，调整细胞密度至 1×10⁵个 /mL，接种于细胞培养瓶。
3. 37℃、5% CO₂恒温培养箱静置培养，24h 首次换液去除未贴壁杂细胞，后续每 2~3 天换液，细胞汇合度 80% 即可传代。
