大鼠肠动脉内皮细胞分离自肠动脉组织;肠道指的是从胃幽门至肛门的消化管。肠是消化管中最长的一段,也是功能最重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的,大肠主要浓缩食物残渣,形成粪便,再通过直肠经肛门排出体外。肠道堪称身体最劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足够的养分,其实它的功能还远不止此——它还是机体内最大的微生态系统。
产品属性
产品名称 大鼠肠动脉内皮细胞
组织来源 肠动脉组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
包被条件: PLL(0.1 mg/mL)或明胶(0.1%)
培养基: 大鼠肠动脉内皮细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 内皮细胞样
传代比例: 1:2
传代特性: 可传2-3代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠肠动脉内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠肠动脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠肠动脉内皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
1. 试剂:预冷 HBSS、0.1% 胶原酶 II、ECM 内皮细胞专用完全培养基、PBS、肝素钠。
2. 器械:显微血管镊、解剖剪、培养皿、离心管、150 目细胞筛。
3. 成年大鼠,器械无菌无酶,消化液现配。
二、取材与预处理
1. 处死大鼠开腹,分离肠系膜动脉分支,剥离外周脂肪与结缔组织。
2. 用预冷肝素 PBS 从血管一端灌洗管腔,冲净管腔内血液。
3. 剪取血管段置于冰上 PBS 中暂存。
三、细胞分离与消化
1. 血管两端结扎,管腔内灌注胶原酶 II 消化液,37℃孵育 25min。
2. 剪开血管,吹打管腔内壁洗脱内皮细胞,培养基中和消化。
3. 滤网过滤悬液,1200rpm 离心 8min 收集细胞。
四、纯化与接种培养
1. ECM 培养基重悬,接种明胶包被培养瓶。
2. 差速贴壁去除平滑肌杂细胞,24h 首次换液。
3. 常规内皮细胞培养,2~3d 换液,细胞呈铺路石样即为纯化内皮细胞。
