大鼠肠道干细胞分离自全肠组织；肠道指的是从胃幽门至肛门的消化管。肠是消化管中最长的一段，也是功能最重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的，大肠主要浓缩食物残渣，形成粪便，再通过直肠经肛门排出体外。肠道堪称身体最劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足够的养分，其实它的功能还远不止此——它还是机体内最大的微生态系统。肠道干细胞（ISC）也称肠道上皮干细胞，主要位于肠黏膜隐窝内，其与肠道黏膜上皮的更新和修复密切相关。正常情况下，位于隐窝基底部的肠道干细胞不断向隐窝顶部（肠腔方向）迁移，整个迁移过程大约3-5 d，在迁移过程中肠道干细胞分化形成不同的肠黏膜细胞。当受到外界生理或病理信号作用时，ISC可持续增殖、分化为成熟肠上皮细胞，如肠型细胞、杯状细胞、内分泌细胞和潘氏细胞等，从而维持肠道黏膜结构和功能的稳定性。
产品属性
产品名称 大鼠肠道干细胞
组织来源 全肠组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 大鼠肠道干细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 悬浮
细胞形态： 球形
传代比例： 1:2
传代特性： 可传3代左右
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠肠道干细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠肠道干细胞经MSI-1免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠肠道干细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化后，用肠道干细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
1. 试剂：预冷 PBS、EDTA 解离液、胶原酶 XI、肠干细胞基础培养基（添加 EGF、Noggin、R-spondin1）、DPBS。
2. 耗材：冰盒、无菌离心管、细胞筛、低吸附培养板。
3. 6~8 周龄大鼠，全程取材冰上操作防止细胞凋亡。
二、取材与预处理
1. 大鼠麻醉放血处死，无菌取出十二指肠至结肠整段肠道。
2. 纵向剪开肠管，预冷 PBS 反复冲刷肠内容物至无粪便杂质。
3. 剪切成 0.5cm 小段，DPBS 反复震荡漂洗 5 次。
三、细胞分离与消化
1. 加入含 EDTA 解离液，冰上摇床震荡 30min，脱落肠隐窝结构。
2. 收集上清，剩余肠段加入胶原酶 XI 短时消化，收集隐窝悬液。
3. 筛网过滤去除绒毛碎片，低速离心富集肠隐窝小体。
四、纯化与接种培养
1. 离心弃上清，干细胞完全培养基重悬隐窝沉淀。
2. 接种于基质胶预铺的培养板中，悬浮 3D 类器官培养。
3. 37℃培养，每 3~4d 更换分化诱导培养基，可形成肠道类器官。
