大鼠表皮黑色素细胞分离自背腹部皮肤组织；表皮位于动物皮肤的外层，由胚胎时期外胚层形成，具有抗摩擦和抗损伤的作用。表皮是皮肤的浅层结构，由复层扁平上皮构成。从基底层到表面可分为五层，即基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。黑色素细胞是皮肤产生和维持色素的主要细胞，起源于神经嵴，后逐渐迁移到表皮和毛囊。黑色素细胞的异常或功能的失常导致了一系列难治性色素性疾病的发生，如白癜风、黄褐斑等。表皮黑色素细胞主要分布于位于表皮的基底层，与表皮细胞共同组成表皮黑素单位，其主要功能是产生黑素小体保护皮肤免受损害。
产品属性
产品名称 大鼠表皮黑色素细胞
组织来源 背腹部皮肤组织
默认种属 SD大鼠，其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基： 大鼠表皮黑色素细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率： 每2-3天换液一次
生长特性： 贴壁
细胞形态： 梭形、多角形
传代比例： 1:2
传代特性： 可传1-2代
消化液： 0.25%胰蛋白酶
大鼠表皮黑色素细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠表皮黑色素细胞经S-100免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠表皮黑色素细胞先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-胶原酶混合消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
1. 试剂：Dispase II 分散酶、0.05% 胰酶、M254 黑色素细胞专用培养基、胎牛血清、PBS、庆大霉素。
2. 耗材：无菌刀片、培养皿、细胞筛、离心管，皮肤取材器械灭菌。
3. 选用 7~14 日龄大鼠腹部背部皮肤，提前配制分散酶 4℃避光备用。
二、取材与预处理
1. 大鼠麻醉处死，剃除腹背毛发，75% 酒精消毒皮肤，剪取整块表皮皮肤组织。
2. PBS 冲洗皮肤 3 次，去除污物血迹，修剪皮下脂肪与结缔组织。
3. 皮肤皮面朝外，浸泡于 Dispase II 溶液中，4℃静置过夜分离表皮与真皮。
三、细胞分离与消化
1. 次日撕取上层表皮组织，剪碎后加入胰酶 37℃消化 15min。
2. 血清终止消化，反复吹打制备单细胞悬液。
3. 100 目滤网过滤，离心 1000r/min 6min 弃上清。
四、纯化与接种培养
1. 专用培养基重悬细胞，接种培养瓶，差速贴壁 30min 去除角质细胞杂细胞。
2. 吸取未贴壁悬液转移至新包被培养瓶继续培养。
3. 37℃培养，每 2~3d 换液，待细胞长出树突即为黑色素细胞，可传代扩增。
