大鼠NG2细胞分离自大脑皮质组织;大脑分左右两个半球,大脑皮质(灰质)覆盖着每个大脑半球的大部分,它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面,即外侧面(约占整个皮质面积的1/3)、内侧面和底面(占2/3的面积);半球表面有很多深浅不等的沟或裂,沟或裂之间的隆起叫回,它们大大增加了大脑的表面积;大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔,使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。NG2细胞是在发育和成年中枢神经系统的灰质和白质束中发现的,因表达NG2蛋白多糖而得名。NG2细胞先前被假定代表少突胶质细胞前体细胞,后来使用转基因的研究表明,NG2细胞在体内不仅能够产生少突胶质细胞,还能产生原浆性星形胶质细胞以及某些情况下的神经元。NG2细胞是中枢神经系统中不同于神经元、成熟少突胶质细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞的一类细胞亚群。此外,在发育和成年中枢神经系统的多个区域,发现NG2细胞和神经元之间存在独特的突触联系,暗示NG2细胞除了可能作为分化成多种细胞的可塑性前体细胞群,还可能会和神经元联系从而形成一个独特的神经胶质网络。
产品属性
产品名称 大鼠NG2细胞
组织来源 大脑皮质组织
默认种属 SD大鼠,其他咨询
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养基: 大鼠NG2细胞完全培养基(含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等)
换液频率: 每2-3天换液一次
生长特性: 贴壁
细胞形态: 梭形、多角形
传代比例: 1:2
传代特性: 可传1-2代
消化液: 0.25%胰蛋白酶
大鼠NG2细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
质量检测
实验室分离的大鼠NG2细胞经NG2免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
方法简介
实验室分离的大鼠NG2细胞采用胰酶消化、专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。
操作步骤
一、实验前准备
1. 试剂:预冷 HBSS、0.125% 胰酶、DMEM 基础培养基、NG2 专用增殖培养基(添加 PDGF-AA、bFGF、10% FBS、双抗)、DNase I。
2. 器械:显微解剖镊、解剖剪、6cm 培养皿、离心管、200 目细胞筛。
3. 动物:新生 1~3d 乳鼠,超净台紫外灭菌,所有液体 4℃预冷。
二、取材与预处理
1. 乳鼠脱颈处死,75% 酒精消毒头部,剪开头皮与颅骨,完整剥离大脑皮层,放入预冷 HBSS。
2. 显微镜下剔除脑膜、血管、白质杂质,仅保留大脑灰质组织。
3. 眼科剪将皮层剪碎至糊状,HBSS 漂洗 2 次去除漂浮血球。
三、细胞分离与消化
1. 加入胰酶 + DNase I 消化液,37℃水浴消化 15min,间断轻柔吹打。
2. 血清培养基终止消化,充分吹打制成单细胞悬液。
3. 200 目筛网过滤,滤液 1000r/min 离心 6min,弃上清收集细胞沉淀。
四、纯化与接种培养
1. 差速贴壁法纯化:悬液铺入培养瓶孵育 2h,贴壁细胞为星形胶质细胞,收集悬浮上清即为 NG2 前体细胞。
2. 离心浓缩上清细胞,专用增殖培养基重悬,密度 3×10⁵/mL 接种。
3. 37℃5% CO₂培养,隔天补加生长因子,每 3d 半量换液,传代使用胰酶消化传代。
